04 // इंटरएक्टिव सूत्र संकलन // भौतिक रसायन, गैस नियम, बलगतिकी और वैद्युतरसायन सूत्रA = ε · l · c = −log₁₀(I / I₀)

बीयर-लैम्बर्ट प्रकाशीय अवशोषण नियम

स्पेक्ट्रोफ़ोटोमेट्री समीकरण जो प्रकाश अवशोषण A को मोलर अवशोषकता ε, पथ लंबाई l और विलयन सांद्रता c से रैखिक रूप में जोड़ता है।

सूत्र संदर्भ
मुख्य सूत्र
A = ε · l · c = −log₁₀(I / I₀)
अन्य रूप
T = I / I₀ = 10^(−A)
c = A / (ε · l)
चर और इकाइयाँ
चर और इकाइयाँ — Beer-Lambert Optical Absorbance Law
SymbolNameUnit
AOptical Absorbance AAU
epsMolar Absorptivity εL/(mol·cm)
lCuvette Path Length lcm
cMolar Concentration cmol/L
इनपुट और मान
[L/(mol·cm)]
[cm]
[mol/L]
गणना का परिणाम (Optical Absorbance A)
A =0.622AU

सूत्र की जानकारी और आधार

  • Differential attenuation dI = −σ N I dx integrated across thickness l yields I = I₀ e^(−σNl), converted to base-10 absorbance A = εlc.
  • Spectrophotometers are most accurate for A between 0.1 and 1.5 AU (transmittance 79% down to 3.2%).

हल किए गए उदाहरण

#1: NADH solution at c = 1.0 × 10⁻⁴ M (100 μM) measured at 340 nm (ε = 6,220 M⁻¹cm⁻¹) in a standard 1.0 cm quartz cuvette.
ε = 6,220 L/(mol·cm)l = 1.0 cmc = 1.0×10⁻⁴ M
A = 6,220 × 1.0 × 0.0001
→ A = 0.622 AU (Transmittance T = 10^(−0.622) = 23.9%)
#2: DNA concentration check at 260 nm where A = 1.00 corresponds to 50 μg/mL dsDNA in a 1 cm path.
Measured A₂₆₀ = 0.48 AUl = 1.0 cm
Concentration = 0.48 × 50 μg/mL
→ 24.0 μg/mL dsDNA
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अक्सर पूछे जाने वाले प्रश्न (FAQ)

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