04 // Compendium Interactif de Formules // CHIMIE PHYSIQUE, LOIS DES GAZ, CINÉTIQUE ET ÉLECTROCHIMIEA = ε · l · c = −log₁₀(I / I₀)

Loi de Beer-Lambert — Absorbance optique et spectrophotométrie

Relie linéairement l'absorbance lumineuse A au coefficient d'extinction molaire ε, à l'épaisseur de cuve l et à la concentration molaire c.

Fiche formule
Formule principale
A = ε · l · c = −log₁₀(I / I₀)
Formes équivalentes
T = I / I₀ = 10^(−A)
c = A / (ε · l)
Variables et unités
Variables et unités — Beer-Lambert Optical Absorbance Law
SymbolNameUnit
AOptical Absorbance AAU
epsMolar Absorptivity εL/(mol·cm)
lCuvette Path Length lcm
cMolar Concentration cmol/L
Valeurs et paramètres
[L/(mol·cm)]
[cm]
[mol/L]
Résultat calculé (Optical Absorbance A)
A =0.622AU

Explications et origine de la formule

  • Differential attenuation dI = −σ N I dx integrated across thickness l yields I = I₀ e^(−σNl), converted to base-10 absorbance A = εlc.
  • Spectrophotometers are most accurate for A between 0.1 and 1.5 AU (transmittance 79% down to 3.2%).

Exemples détaillés

#1: NADH solution at c = 1.0 × 10⁻⁴ M (100 μM) measured at 340 nm (ε = 6,220 M⁻¹cm⁻¹) in a standard 1.0 cm quartz cuvette.
ε = 6,220 L/(mol·cm)l = 1.0 cmc = 1.0×10⁻⁴ M
A = 6,220 × 1.0 × 0.0001
→ A = 0.622 AU (Transmittance T = 10^(−0.622) = 23.9%)
#2: DNA concentration check at 260 nm where A = 1.00 corresponds to 50 μg/mL dsDNA in a 1 cm path.
Measured A₂₆₀ = 0.48 AUl = 1.0 cm
Concentration = 0.48 × 50 μg/mL
→ 24.0 μg/mL dsDNA
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Questions Fréquemment Posées

Comment utiliser l'outil Loi de Beer-Lambert — Absorbance optique et spectrophotométrie en ligne ?+

Modifiez les paramètres pour résoudre et visualiser Loi de Beer-Lambert — Absorbance optique et spectrophotométrie selon la formule A = ε · l · c = −log₁₀(I / I₀) instantanément dans votre navigateur. Relie linéairement l'absorbance lumineuse A au coefficient d'extinction molaire ε, à l'épaisseur de cuve l et à la concentration molaire c.

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