04 // Interaktives Formel-Kompendium // PHYSIKALISCHE CHEMIE, GASGESETZE, KINETIK & ELEKTROCHEMIEA = ε · l · c = −log₁₀(I / I₀)

Lambert-Beersches Gesetz — Optische Extinktion & Spektralfotometrie

Stellt den linearen Zusammenhang zwischen Lichtabsorption A, molarem Extinktionskoeffizienten ε, Schichtdicke l und Stoffkonzentration c her.

Formelübersicht

Hauptformel

A = ε · l · c = −log₁₀(I / I₀)

Umgestellte Formen

T = I / I₀ = 10^(−A)

c = A / (ε · l)

Variablen & Einheiten

Variablen & Einheiten — Beer-Lambert Optical Absorbance Law
Symbol	Name	Unit
A	Optical Absorbance A	AU
eps	Molar Absorptivity ε	L/(mol·cm)
l	Cuvette Path Length l	cm
c	Molar Concentration c	mol/L

Eingaben & Parameter

epsMolar Absorptivity ε[L/(mol·cm)]

lCuvette Path Length l[cm]

cMolar Concentration c[mol/L]

Berechnetes Ergebnis (Optical Absorbance A)

A =0.622AU

Formelhinweise & Herleitung

Differential attenuation dI = −σ N I dx integrated across thickness l yields I = I₀ e^(−σNl), converted to base-10 absorbance A = εlc.
Spectrophotometers are most accurate for A between 0.1 and 1.5 AU (transmittance 79% down to 3.2%).

Durchgerechnete Beispiele

#1: NADH solution at c = 1.0 × 10⁻⁴ M (100 μM) measured at 340 nm (ε = 6,220 M⁻¹cm⁻¹) in a standard 1.0 cm quartz cuvette.

ε = 6,220 L/(mol·cm)l = 1.0 cmc = 1.0×10⁻⁴ M

A = 6,220 × 1.0 × 0.0001

→ A = 0.622 AU (Transmittance T = 10^(−0.622) = 23.9%)

#2: DNA concentration check at 260 nm where A = 1.00 corresponds to 50 μg/mL dsDNA in a 1 cm path.

Measured A₂₆₀ = 0.48 AUl = 1.0 cm

Concentration = 0.48 × 50 μg/mL

→ 24.0 μg/mL dsDNA

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Häufig gestellte Fragen (FAQ)

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